在细胞培养实验中，有时，我们为了了解细胞的生长情况，总免不了要给细胞计数，那如何给细胞计数呢，计数前我们还有哪些问题要注意呢？

下面就给大家说说在细胞培养实验中细胞计数的详细步骤的方法：

1、首先准备好细胞计数器(血球计数板)。

细胞培养实验开始计数前，我们要先使用70%乙醇将盖玻片和细胞计数板清洁、晾干备用，将晾干的盖玻片轻轻覆盖至血细胞计数器上。(提醒：一定要保证盖玻片和计数板已充分晾干，不然对后续操作和实验结果会造成影响。)

2、制备细胞悬液。

对于贴壁生长的细胞，需要使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落，然后加入适当的含血清培养基，中和胰酶的作用并重悬细胞，以得到均质的细胞悬液。尽可能将细胞吹散，不要残留任何细胞团，但不可用力过大。

3、台盼兰染色。

在细胞培养实验中，如果需要计算细胞的活率，则需要将细胞悬液和0.4%台盼兰等体积混合;室温孵育3-5分钟(提醒：悬浮细胞染色时间可视情况适当延长)，使台盼兰完全进入死细胞，使死细胞着蓝色。

4、血细胞计数器加样。

使用吸管或移液器将细胞悬液或细胞/台盼兰混合液滴加到计数池的边缘。此时液滴将在虹吸的作用下进入盖玻片下方的计数池，此即为充池。(提醒：两侧都要加，并且若需进行多个样品的计数，应尽量保证每次充池的体积一致。)

5、细胞计数

在显微镜下，移动计数板将视野对准计数板的中央大方块，在细胞培养实验中，我们的计数原则为：“数上不数下，数左不数右”。多个细胞吹不散成团的即为一个计数。

文章出自 细胞实验外包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/